روغن خالص Saposhnikovia divaricata برای ساخت شمع و صابون اسانس پخش کننده عمده فروشی جدید برای دیفیوزرهای نی سوز

توضیحات کوتاه:

2.1. تهیه SDE

ریزوم های SD به عنوان گیاه خشک از شرکت Hanherb (گوری، کره) خریداری شد. مواد گیاهی از نظر طبقه بندی توسط دکتر گو-یا چوی از موسسه پزشکی شرقی کره (KIOM) تایید شد. یک نمونه کوپن (شماره 2014 SDE-6) در هرباریوم کره ای از منابع گیاهی استاندارد سپرده شد. ریزوم های خشک شده SD (320 گرم) دو بار با اتانول 70 درصد (با رفلاکس 2 ساعته) استخراج شد و سپس عصاره تحت فشار کاهش یافته تغلیظ شد. جوشانده صاف شده، لیوفیلیز شده و در دمای 4 درجه سانتی گراد نگهداری شد. بازده عصاره خشک از مواد اولیه خام 13/48 درصد (وزنی/وزنی) بود.

2.2. تجزیه و تحلیل کمّی کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC).

تجزیه و تحلیل کروماتوگرافی با یک سیستم HPLC (شرکت آب، میلفورد، MA، ایالات متحده آمریکا) و یک آشکارساز آرایه فتودیود انجام شد. برای تجزیه و تحلیل HPLC SDE، prim-O-استاندارد گلوکوزیلسیمیفوگین از مؤسسه ترویج کره برای صنعت طب سنتی (گیونگسان، کره) خریداری شده است.sec-O-گلوکوزیلهامودول و 4′-O-β-D-glucosyl-5-Oمتیل ویزامینول در آزمایشگاه ما جدا شد و با تجزیه و تحلیل طیفی، در درجه اول توسط NMR و MS شناسایی شد.

نمونه SDE (0.1 میلی گرم) در اتانول 70 درصد (10 میلی لیتر) حل شد. جداسازی کروماتوگرافی با ستون XSelect HSS T3 C18 (4.6 × 250 میلی متر، 5) انجام شد.μm، Waters Co.، Milford، MA، ایالات متحده آمریکا). فاز متحرک شامل استونیتریل (A) و 0.1٪ اسید استیک در آب (B) با سرعت جریان 1.0 میلی لیتر در دقیقه بود. یک برنامه گرادیان چند مرحله ای به شرح زیر استفاده شد: 5٪ A (0 دقیقه)، 5-20٪ A (0-10 دقیقه)، 20٪ A (10-23 دقیقه)، و 20-65٪ A (23-40 دقیقه) ). طول موج تشخیص در 210-400 نانومتر اسکن شد و در 254 نانومتر ثبت شد. حجم تزریق 10.0 بودμL. محلول های استاندارد برای تعیین سه کرومون در غلظت نهایی 7.781 میلی گرم بر میلی لیتر (prim-O-گلوکوزیلسیمیفوژین)، 31.125 میلی گرم در میلی لیتر (4'-)O-β-D-glucosyl-5-Oمتیل ویزامینول) و 31.125 میلی گرم در میلی لیتر (sec-O-glucosylhamaudol) در متانول و در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری می شود.

2.3. ارزیابی فعالیت ضد التهابیدر شرایط آزمایشگاهی

2.3.1. کشت سلولی و درمان نمونه

سلول های RAW 264.7 از مجموعه کشت نوع آمریکایی (ATCC، Manassas، VA، USA) به دست آمد و در محیط DMEM حاوی 1٪ آنتی بیوتیک و 5.5٪ FBS رشد کردند. سلول ها در اتمسفر مرطوب 5% CO2 در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه شدند. برای تحریک سلول ها، محیط با محیط DMEM تازه و لیپوپلی ساکارید (LPS، Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) در 1 جایگزین شد.μگرم در میلی لیتر در حضور یا عدم حضور SDE (200 یا 400) اضافه شدμگرم در میلی لیتر) به مدت 24 ساعت دیگر.

2.3.2. تعیین نیتریک اکسید (NO)، پروستاگلاندین E2 (PGE2)، فاکتور نکروز تومور-α(TNF-α، و تولید اینترلوکین-6 (IL-6).

سلول ها با SDE تحت درمان قرار گرفتند و با LPS به مدت 24 ساعت تحریک شدند. بر اساس مطالعه قبلی، تولید NO با اندازه گیری نیتریت با استفاده از معرف Griess تجزیه و تحلیل شد.12]. ترشح سیتوکین های التهابی PGE2، TNF-αو IL-6 با استفاده از کیت ELISA (سیستم های تحقیق و توسعه) مطابق دستورالعمل سازنده تعیین شد. اثرات SDE بر تولید NO و سیتوکین در طول موج 540 نانومتر یا 450 نانومتر با استفاده از Wallac EnVision تعیین شد.™میکروپلیت خوان (PerkinElmer).

2.4. ارزیابی فعالیت ضد استئوآرتریتدر ویو

2.4.1. حیوانات

موش‌های نر Sprague-Dawley (7 هفته‌ای) از Samtako Inc. (Osan، کره) خریداری شدند و تحت شرایط کنترل‌شده با چرخه نور/تاریکی 12 ساعت در محل نگهداری شدند.درجه سانتی گراد ودرصد رطوبت موش ها با رژیم غذایی آزمایشگاهی و آب ارائه شدندآزادانه. تمام روش‌های آزمایشی مطابق با دستورالعمل‌های مؤسسه ملی بهداشت (NIH) و تأیید شده توسط کمیته مراقبت و استفاده از حیوانات دانشگاه Daejeon (Daejeon، جمهوری کره) انجام شد.

2.4.2. القای OA با MIA در موش صحرایی

حیوانات قبل از شروع مطالعه به صورت تصادفی در گروه های درمانی قرار گرفتند.در هر گروه). محلول MIA (3 میلی گرم در 50μL 9/0 درصد سالین) تحت بیهوشی با مخلوطی از کتامین و زایلازین مستقیماً به فضای داخل مفصلی زانوی راست تزریق شد. موش ها به طور تصادفی به چهار گروه تقسیم شدند: (1) گروه سالین بدون تزریق MIA، (2) گروه MIA با تزریق MIA، (3) گروه تحت درمان با SDE (200 میلی گرم بر کیلوگرم) با تزریق MIA، و (4) گروه تحت درمان با ایندومتاسین (IM-) (2 میلی گرم بر کیلوگرم) با تزریق MIA. 1 هفته قبل از تزریق MIA به مدت 4 هفته، موش‌ها به صورت خوراکی با SDE و IM تجویز شدند. دوز SDE و IM مورد استفاده در این مطالعه بر اساس دوزهای استفاده شده در مطالعات قبلی بود [10،13،14].

2.4.3. اندازه گیری توزیع تحمل وزن Hindpaw

پس از القای استئوآرتریت، تعادل اولیه در قابلیت تحمل وزن پاهای عقبی مختل شد. یک تستر ناتوانی (Linton instrumentation، Norfolk، UK) برای ارزیابی تغییرات در تحمل تحمل وزن استفاده شد. موش ها با دقت در محفظه اندازه گیری قرار گرفتند. نیروی تحمل وزن اعمال شده توسط اندام عقبی در یک دوره 3 ثانیه به طور متوسط محاسبه شد. نسبت توزیع وزن با معادله زیر محاسبه شد: [وزن اندام عقب راست/(وزن اندام عقب راست + وزن اندام عقبی چپ)] × 100 [15].

2.4.4. اندازه گیری سطوح سیتوکین سرم

نمونه های خون در 1500 گرم به مدت 10 دقیقه در دمای 4 درجه سانتی گراد سانتریفیوژ شدند. سپس سرم جمع آوری شد و تا زمان استفاده در دمای 70- درجه سانتیگراد نگهداری شد. سطوح IL-1βIL-6، TNF-αو PGE2 در سرم با استفاده از کیت های ELISA از R&D Systems (Minneapolis، MN، USA) طبق دستورالعمل سازنده اندازه گیری شد.

2.4.5. تجزیه و تحلیل کمی RT-PCR در زمان واقعی

RNA کل از بافت مفصل زانو با استفاده از معرف TRI استخراج شد (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)، رونویسی معکوس به cDNA و PCR با استفاده از کیت TM One Step RT PCR با SYBR سبز (Applied Biosystems) تکثیر شد. گراند آیلند، نیویورک، ایالات متحده آمریکا). PCR کمی در زمان واقعی با استفاده از سیستم Real-Time PCR Applied Biosystems 7500 (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA) انجام شد. توالی پرایمر و دنباله پروب در جدول نشان داده شده است1. مقدار کمی از cDNA های نمونه و مقدار مساوی cDNA GAPDH با مخلوط اصلی TaqMan® Universal PCR حاوی DNA پلیمراز مطابق دستورالعمل سازنده (Applied Biosystems, Foster, CA, USA) تکثیر شد. شرایط PCR 2 دقیقه در دمای 50 درجه سانتی گراد، 10 دقیقه در دمای 94 درجه سانتی گراد، 15 ثانیه در دمای 95 درجه سانتی گراد و 1 دقیقه در دمای 60 درجه سانتی گراد برای 40 سیکل بود. غلظت ژن هدف با استفاده از روش مقایسه ای Ct (تعداد چرخه آستانه در نقطه متقاطع بین نمودار تقویت و آستانه) طبق دستورالعمل سازنده تعیین شد.

قیمت فوب:0.5 - 9999 دلار آمریکا / قطعه

حداقل تعداد سفارش:100 قطعه/قطعه

توانایی تامین:10000 قطعه/قطعه در ماه

برای ما ایمیل بفرستید

جزئیات محصول

برچسب های محصول

استئوآرتریت (OA) شایع ترین اختلال اسکلتی عضلانی و شایع ترین بیماری دژنراتیو مفصلی در افراد مسن است.1]. استئوآرتریت وضعیتی است که تا حدی به دلیل آسیب، از دست دادن ساختار و عملکرد غضروف، و اختلال در تنظیم مسیرهای پیش التهابی و ضد التهابی ایجاد می شود.2،3]. این بیماری عمدتاً غضروف مفصلی و استخوان زیر غضروفی مفاصل سینوویال را تحت تأثیر قرار می دهد و منجر به نارسایی مفصل می شود که منجر به درد در هنگام تحمل وزن از جمله راه رفتن و ایستادن می شود.4].

هیچ درمانی برای OA وجود ندارد، زیرا بازیابی غضروف پس از از بین رفتن بسیار دشوار است.5]. اهداف درمان تسکین درد، حفظ یا بهبود تحرک مفصل، افزایش قدرت مفاصل و به حداقل رساندن اثرات ناتوان کننده بیماری است. هدف از درمان های دارویی OA کاهش درد به منظور افزایش عملکرد مفصل و کیفیت زندگی بیمار است. اگرچه تخریب غضروف رویداد اصلی در OA است، تخریب کلاژن حادثه اساسی است که پیشرفت غیرقابل برگشت OA در ارتباط با التهاب را تعیین می کند.6،7]. انتظار می رود درمان هایی با فعالیت ضد التهابی و غضروفی محافظ درد را کاهش داده و یکپارچگی ماتریکس را در بیماران OA حفظ کند.

بنابراین، کاهش التهاب احتمالاً در مدیریت OA مفید خواهد بود. مطالعات اخیر نقش محافظتی منابع گیاهی را در پیشرفت OA، از نظر کاهش التهاب غضروفی و تخریب بیشتر غضروف، از طریق توانایی آنها در تعامل با بافت های مرتبط با مفصل، که منجر به کاهش درد مفاصل می شود، نشان می دهد.8].

ریشه ازSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) به طور گسترده در طب سنتی برای درمان سردرد، درد، التهاب و آرتریت در کره و چین استفاده شده است.9،10]. اثرات دارویی متنوع ازSaposhnikovia divaricata(SD) همچنین دارای خواص ضد التهابی، ضد درد، تب بر و ضد آرتریت می باشد.9،11]. یک مطالعه اخیر نشان داد که عصاره کرومون SD دارای اثرات بالقوه آرتریت ضد روماتوئید در مدل موش آرتریت ناشی از کلاژن است.10]؛ با این حال، مطالعات کمی برای حمایت از فعالیت ضد التهابی و ضد آرتریت انجام شده استSaposhnikovia divaricataاستخراج (SDE).

بنابراین، مطالعه حاضر فعالیت های ضد التهابی و ضد استئوآرتریت عصاره اتانولی 70 درصد SD را بررسی کرد. ابتدا اثر ضد التهابی SDE مورد بررسی قرار گرفتدر شرایط آزمایشگاهیدر سلول های RAW 264.7 ناشی از LPS. در مرحله بعد، اثر ضد استئوآرتریت SDE با ارزیابی توزیع تحمل وزن، تخریب غضروف مفصلی، و پاسخ های التهابی در مدل موش از OA القا شده از مونوسدیم یدوااستات (MIA-) اندازه گیری شد.