روغن خالص ساپوشنیکوویا دیواریکاتا برای شمع سازی و صابون سازی، پخش کننده عمده روغن ضروری جدید برای پخش کننده های مشعل نی

شرح مختصر:

2.1 تهیه SDE

ریزوم‌های گیاه SD به صورت خشک از شرکت Hanherb (گوری، کره) خریداری شدند. مواد گیاهی توسط دکتر Go-Ya Choi از موسسه پزشکی شرقی کره (KIOM) از نظر طبقه‌بندی تأیید شدند. یک نمونه گواهی (شماره 2014 SDE-6) در هرباریوم منابع گیاهی استاندارد کره نگهداری شد. ریزوم‌های خشک شده SD (320 گرم) دو بار با اتانول 70٪ (با رفلاکس 2 ساعته) عصاره‌گیری شدند و سپس عصاره تحت فشار کاهش یافته تغلیظ شد. جوشانده فیلتر، لیوفیلیزه و در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری شد. بازده عصاره خشک از مواد اولیه خام 48.13٪ (وزنی/وزنی) بود.

۲.۲ آنالیز کمی کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC)

آنالیز کروماتوگرافی با یک سیستم HPLC (شرکت واترز، میلفورد، ماساچوست، ایالات متحده) و یک آشکارساز آرایه فوتودیود انجام شد. برای آنالیز HPLC SDE، ابتداOاستاندارد گلوکوزیلسیمیفوجین از موسسه ترویج صنعت طب سنتی کره (گیونگسان، کره) خریداری شد، وثانیه-O-گلوکوزیل هامودول و 4'-O-β-دی-گلوکوزیل-۵-O-متیل‌ویزامینول در آزمایشگاه ما جداسازی و با آنالیزهای طیفی، عمدتاً توسط NMR و MS شناسایی شدند.

نمونه‌های SDE (0.1 میلی‌گرم) در اتانول 70٪ (10 میلی‌لیتر) حل شدند. جداسازی کروماتوگرافی با ستون XSelect HSS T3 C18 (4.6 × 250 میلی‌متر، 5) انجام شد.μمتر، شرکت واترز، میلفورد، ماساچوست، ایالات متحده آمریکا). فاز متحرک شامل استونیتریل (A) و 0.1٪ اسید استیک در آب (B) با سرعت جریان 1.0 میلی‌لیتر در دقیقه بود. یک برنامه گرادیان چند مرحله‌ای به شرح زیر استفاده شد: 5٪ A (0 دقیقه)، 5-20٪ A (0-10 دقیقه)، 20٪ A (10-23 دقیقه) و 20-65٪ A (23-40 دقیقه). طول موج تشخیص در 210-400 نانومتر اسکن و در 254 نانومتر ثبت شد. حجم تزریق 10.0μL. محلول‌های استاندارد برای تعیین سه کرومون با غلظت نهایی 7.781 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر (اولیه) تهیه شدند.O-گلوکوزیلسیمیفوگین)، ۳۱.۱۲۵ میلی‌گرم بر میلی‌لیتر (۴′-O-β-دی-گلوکوزیل-۵-O-متیل ویسامینول) و 31.125 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر (ثانیه-O-گلوکوزیل هامودول) در متانول و در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری شد.

۲.۳ ارزیابی فعالیت ضد التهابیدر شرایط آزمایشگاهی

۲.۳.۱ کشت سلولی و تیمار نمونه

سلول‌های RAW 264.7 از مجموعه کشت‌های نوع آمریکایی (ATCC، ماناساس، ویرجینیا، ایالات متحده آمریکا) تهیه و در محیط کشت DMEM حاوی 1٪ آنتی‌بیوتیک و 5.5٪ FBS رشد داده شدند. سلول‌ها در اتمسفر مرطوب 5٪ CO2 در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه شدند. برای تحریک سلول‌ها، محیط کشت با محیط کشت DMEM تازه و لیپوپلی‌ساکارید (LPS، شرکت شیمیایی سیگما-آلدریچ، سنت لوئیس، میسوری، ایالات متحده آمریکا) در دمای 1 درجه سانتیگراد جایگزین شد.μگرم بر میلی‌لیتر در حضور یا عدم حضور SDE (200 یا 400) اضافه شد.μگرم بر میلی‌لیتر) به مدت 24 ساعت دیگر.

۲.۳.۲ تعیین اکسید نیتریک (NO)، پروستاگلاندین E2 (PGE2)، فاکتور نکروز تومورα(TNF-α) و تولید اینترلوکین-۶ (IL-6)

سلول‌ها با SDE تیمار شده و به مدت 24 ساعت با LPS تحریک شدند. تولید NO با اندازه‌گیری نیتریت با استفاده از معرف گریس طبق مطالعه قبلی [] مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.12ترشح سیتوکین‌های التهابی PGE2، TNF-αو IL-6 با استفاده از کیت ELISA (سیستم‌های تحقیق و توسعه) طبق دستورالعمل سازنده تعیین شد. اثرات SDE بر تولید NO و سیتوکین در طول موج‌های 540 نانومتر یا 450 نانومتر با استفاده از Wallac EnVision تعیین شد.™دستگاه خواننده میکروپلیت (PerkinElmer)

۲.۴ ارزیابی فعالیت ضد استئوآرتریتدر داخل بدن

۲.۴.۱ حیوانات

موش‌های نر نژاد Sprague-Dawley (7 هفته‌ای) از شرکت Samtako Inc. (اوسان، کره) خریداری شدند و تحت شرایط کنترل‌شده با چرخه روشنایی/تاریکی 12 ساعته در ... نگهداری شدند.درجه سانتیگراد ودرصد رطوبت. به موش‌ها رژیم غذایی آزمایشگاهی و آب داده شد.آزادانهتمام مراحل آزمایش مطابق با دستورالعمل‌های مؤسسه ملی بهداشت (NIH) انجام شد و توسط کمیته مراقبت و استفاده از حیوانات دانشگاه دائجون (دائجون، جمهوری کره) تأیید شد.

۲.۴.۲ القای آرتروز با MIA در موش‌ها

حیوانات قبل از شروع مطالعه به صورت تصادفی به گروه‌های درمانی تقسیم شدند (در هر گروه). محلول MIA (3 میلی‌گرم/50μ(L از محلول نمکی 0.9٪) مستقیماً به فضای داخل مفصلی زانوی راست تحت بیهوشی القا شده با مخلوطی از کتامین و زایلازین تزریق شد. موش‌ها به طور تصادفی به چهار گروه تقسیم شدند: (1) گروه نمکی بدون تزریق MIA، (2) گروه MIA با تزریق MIA، (3) گروه تحت درمان با SDE (200 میلی‌گرم بر کیلوگرم) با تزریق MIA، و (4) گروه تحت درمان با ایندومتاسین (IM-) (2 میلی‌گرم بر کیلوگرم) با تزریق MIA. موش‌ها 1 هفته قبل از تزریق MIA به مدت 4 هفته به صورت خوراکی با SDE و IM تغذیه شدند. دوز SDE و IM مورد استفاده در این مطالعه بر اساس دوز استفاده شده در مطالعات قبلی بود [10،13،14].

۲.۴.۳ اندازه‌گیری‌های توزیع تحمل وزن پنجه عقب

پس از القای آرتروز، تعادل اولیه در توانایی تحمل وزن پنجه‌های عقبی مختل شد. از یک دستگاه سنجش ناتوانی (Linton Instrumentation، نورفولک، انگلستان) برای ارزیابی تغییرات در تحمل وزن استفاده شد. موش‌ها با دقت در محفظه اندازه‌گیری قرار داده شدند. نیروی تحمل وزن اعمال شده توسط اندام عقبی در یک دوره ۳ ثانیه‌ای میانگین‌گیری شد. نسبت توزیع وزن با معادله زیر محاسبه شد: [وزن روی اندام عقبی راست / (وزن روی اندام عقبی راست + وزن روی اندام عقبی چپ)] × ۱۰۰ [15].

۲.۴.۴ اندازه‌گیری سطح سیتوکین سرم

نمونه‌های خون به مدت 10 دقیقه در دمای 4 درجه سانتی‌گراد با سرعت 1500 گرم سانتریفیوژ شدند؛ سپس سرم جمع‌آوری و تا زمان استفاده در دمای 70- درجه سانتی‌گراد نگهداری شد. سطوح IL-1β، IL-6، TNF-αو PGE2 در سرم با استفاده از کیت‌های ELISA از R&D Systems (مینیاپولیس، مینه‌سوتا، ایالات متحده آمریکا) طبق دستورالعمل سازنده اندازه‌گیری شدند.

۲.۴.۵ آنالیز کمی RT-PCR در زمان واقعی

RNA کل با استفاده از معرف TRI® (سیگما-آلدریچ، سنت لوئیس، میسوری، ایالات متحده) از بافت مفصل زانو استخراج شد، به صورت معکوس به cDNA رونویسی شد و با استفاده از کیت PCR One Step TM RT با SYBR green (Applied Biosystems، گرند آیلند، نیویورک، ایالات متحده) با PCR تکثیر شد. PCR کمی در زمان واقعی با استفاده از سیستم PCR Real-Time 7500 Applied Biosystems (Applied Biosystems، گرند آیلند، نیویورک، ایالات متحده) انجام شد. توالی‌های آغازگر و توالی پروب در جدول نشان داده شده است.1. مقادیری از cDNAهای نمونه و مقدار مساوی از cDNAی GAPDH با مخلوط اصلی TaqMan® Universal PCR حاوی DNA پلیمراز طبق دستورالعمل سازنده (Applied Biosystems, Foster, CA, USA) تکثیر شدند. شرایط PCR شامل 2 دقیقه در دمای 50 درجه سانتیگراد، 10 دقیقه در دمای 94 درجه سانتیگراد، 15 ثانیه در دمای 95 درجه سانتیگراد و 1 دقیقه در دمای 60 درجه سانتیگراد به مدت 40 سیکل بود. غلظت ژن هدف با استفاده از روش مقایسه‌ای Ct (تعداد سیکل آستانه در نقطه تقاطع بین نمودار تکثیر و آستانه) طبق دستورالعمل سازنده تعیین شد.

قیمت فوب:۰.۵ تا ۹۹۹۹ دلار آمریکا / قطعه

حداقل مقدار سفارش:۱۰۰ قطعه/قطعات

توانایی تامین:10000 قطعه/قطعه در هر ماه

برای ما ایمیل ارسال کنید

جزئیات محصول

برچسب‌های محصول

آرتروز (OA) شایع‌ترین اختلال اسکلتی-عضلانی و شایع‌ترین بیماری دژنراتیو مفصلی در سالمندان است [1].1آرتروز وضعیتی است که تا حدودی در اثر آسیب، از بین رفتن ساختار و عملکرد غضروف و اختلال در تنظیم مسیرهای پیش التهابی و ضد التهابی ایجاد می‌شود.2،3این بیماری در درجه اول غضروف مفصلی و استخوان زیرغضروفی مفاصل سینوویال را تحت تأثیر قرار می‌دهد و منجر به نارسایی مفصل می‌شود و منجر به درد هنگام تحمل وزن از جمله راه رفتن و ایستادن می‌شود.4].

هیچ درمانی برای آرتروز وجود ندارد، زیرا ترمیم غضروف پس از تخریب آن بسیار دشوار است.5]. اهداف درمان عبارتند از تسکین درد، حفظ یا بهبود تحرک مفاصل، افزایش قدرت مفاصل و به حداقل رساندن اثرات ناتوان‌کننده بیماری. درمان‌های دارویی آرتروز با هدف کاهش درد به منظور افزایش عملکرد مفاصل و کیفیت زندگی بیمار انجام می‌شود. اگرچه تخریب غضروف رویداد اصلی در آرتروز است، اما تخریب کلاژن حادثه اساسی است که پیشرفت برگشت‌ناپذیر آرتروز را در ارتباط با التهاب تعیین می‌کند.6،7انتظار می‌رود درمان‌هایی با فعالیت ضدالتهابی و محافظت‌کننده غضروف، درد را تسکین داده و یکپارچگی ماتریکس را در بیماران مبتلا به آرتروز حفظ کنند.

بنابراین، کاهش التهاب احتمالاً در مدیریت آرتروز مفید خواهد بود. مطالعات اخیر نقش‌های محافظتی منابع گیاهی را در پیشرفت آرتروز، از نظر کاهش التهاب کندروسیت‌ها و تخریب بیشتر غضروف، از طریق توانایی آنها در تعامل با بافت‌های مرتبط با مفصل، که منجر به کاهش درد مفاصل می‌شود، نشان می‌دهد [8].

ریشهساپوشنیکوویا دیواریکاتاگیاه شیشکین (Umbelliferae) به طور گسترده در طب سنتی برای درمان سردرد، درد، التهاب و آرتروز در کره و چین مورد استفاده قرار گرفته است.9،10اثرات دارویی متنوعساپوشنیکوویا دیواریکاتا(SD) همچنین شامل خواص ضد التهابی، ضد درد، ضد تب و ضد آرتریت است [9،11یک مطالعه اخیر نشان داد که عصاره کرومون SD دارای اثرات بالقوه ضد آرتریت روماتوئید در مدل موشی آرتریت ناشی از کلاژن است.10با این حال، مطالعات کمی برای حمایت از فعالیت ضد التهابی و ضد آرتریت آن انجام شده است.ساپوشنیکوویا دیواریکاتاعصاره (SDE).

بنابراین، مطالعه حاضر به بررسی فعالیت‌های ضد التهابی و ضد استئوآرتریت عصاره اتانولی 70٪ SD پرداخت. ابتدا، اثر ضد التهابی SDE ارزیابی شد.در شرایط آزمایشگاهی (in vitro)در سلول‌های RAW 264.7 القا شده توسط LPS. در مرحله بعد، اثر ضد استئوآرتریت SDE با ارزیابی توزیع تحمل وزن، تخریب غضروف مفصلی و پاسخ‌های التهابی در مدل موش صحرایی مبتلا به استئوآرتریت القا شده توسط مونوسدیم یدواستات (MIA-) اندازه‌گیری شد.